1系统调查
1.1黄板法 在蔬菜集中种植区,选择芹菜、豆类或番茄田,于4-10月间(保护地蔬菜为整个生长期),在作物垄间插上涂有粘蝇胶的黄色板,黄板规格30cm×20cm ,高度略高于植株,每类田块插3-5块,5-7天检查一次,主害代(8月中下旬至10月下旬)3天检查一次粘虫数,计算每块黄板平均成虫数,结果记入表1。每次检查后及时去除黄板上所粘成虫。
表1斑潜蝇黄板法系统调查记载表
调查日期 |
作物 |
品种 |
生育期 |
成虫数 |
备注 |
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1.2蛹盘法 选择处于生长中后期的芹菜、豆类或番茄等蔬菜田,在地垄间放置塑料盘(20cm×30cm×5cm),共放10盆,每盆距离4m,每3-4天统计盆内蛹量,结果记入表2,并及时清除。
表2 斑潜蝇蛹盘法系统调查记载表
调查日期 |
作物 |
生育期 |
各级蛹数及比例 |
备注 | |||||
1级 |
2级 |
3级 | |||||||
数量 |
比例 |
数量 |
比例 |
数量 |
比例 | ||||
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2大田调查
(1)调查方法
采集有斑潜蝇危害潜道并具有活虫的蔬菜叶片,分别置于不同的透明塑料袋内,同时记录采集时间、采集地点和寄主植物名称并带回实验室继续饲养,待幼虫化蛹后,将蛹用毛笔挑至玻璃试管中并用纱网封住管口(防止成虫羽化后飞走逃跑),放置于培养箱,直至羽化为成虫,然后将羽化出的部分成虫浸泡在75%酒精中用于形态鉴定,部分成虫浸泡在100%的酒精中,迅速放置于-20℃冰箱保存,用于分子鉴定。
(2)危害等级划分
从每个调查点采集的寄主中随机选取10张叶片,记录每片寄主叶片上的幼虫数,总潜道数及死虫数,并测定寄主叶片的叶面积,以便统计单位叶面积的虫量(头/ cm2)。危害程度按单位叶面积(头/cm2)潜道数量分为4级:1级<0.1,2级0.1~0.5,3级0.5~1,4级>1,分别记作+,++,+++,++++。
种类鉴定方法
(1)形态鉴定
将浸泡在75%乙醇中的样本取出, 根据成虫的内外顶鬃着生位置情况进行初步鉴定, 然后选择雄虫对其外生殖器进行解剖, 根据外生殖器的形态特征做进一步判定, 具体方法参考Spencer和Shiao方法。
(2)分子鉴定
利用通用引物对线粒体COI基因进行PCR扩增,将扩增产物纯化并测序,最后对测序结果进行校对和拼接,利用网络同源序列搜索引擎BLAST(http:www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST)对GenBank中的同源序列进行比较,通过该基因片段确定所属种类。